潔凈室質量控制及其檢測|

潔凈室對于制藥工業的重要意義已為人們肯定。生物制品 是制 藥工業的一部分，對生產廠房有很高的潔凈要求^{［1，2］}。Gilland等曾在市售的 嗜酸乳桿菌產品中，分離到人為污染的短乳桿菌、發酵乳桿菌和植物乳桿菌等^［3］ 。生物制品生產中，尤其是活菌、活疫苗的生產中，經常受到不同程度的污染，因此，不僅 需要重視潔凈室的建立，更要重視質量控制方法及標準。

朝鮮戰爭中，美國發現大量電子儀器失靈，最后找到了主要原因，是灰塵在作怪，促成了潔凈技術的起步。1961年，誕生了世界上最早的潔凈室標準，既美國空軍技術條令203，1963 年，頒布了國際上最著名的潔凈室標準：美國聯邦FS209。1966年，頒布了修訂后的209A，時至1992年，建立了迄今被廣泛采用的209E。國際上為了加強藥品、生物制品質量管理規范 (GMP)，把潔凈室定為必備的生產硬件之一。GMP對廠房、設備等，明確規定了相應的潔凈要求，并制訂了有關標準。        

　1　潔凈室的污染源

　　潔凈室污染源按性質可分物理、化學、生物等。直徑在0.001-1000μm的固態、液態或二者的混合物質，包括生物粒子和非生物粒子，我們稱為懸浮粒子(airborne particles)。微生 物一般以無生命的粒子作載體而懸浮，以氣溶膠(Aerosol)形式存在于空氣中，1μm以下者永外懸浮，10μm以上者會逐漸沉下來而形成菌塵。潔凈室污染可分為外部污染和內部污 染。外部污染指大氣塵污染，可以通過光電法測得。內部污染，是由人和有關的物品、設備等引起的。人是潔凈室最大的污染源，占90%左右。人和環境造成了潔凈室的污染，所以在 潔凈室中，人的數量和活動應有特別嚴格的限制。一般男性每人每分鐘向周圍排放1000個以上的含菌粒子，女性為750個以上。穿衣服時，靜止態發菌量為10-300個/min·人，行走時 的發菌量為900-2500個/min·人?？人砸淮伟l菌量為70-700個/min·人，噴嚏一次為400-60 0個/min·人^{［4，5］}。

　　2　潔凈室質控標準

表1　世界主要國家潔凈室標準(潔凈度級別)

美國	日本	西德	美國	澳大利 亞	法國	歐共體	中國
Fed Std 　　209	JACA 　　Std No24	VDI 　　2083	BSI 　　BS 5295	AS 　　AS 1386	AFNOR 　　X.44101	EEC 　　GMP	GB
-	1	-	-	-	-	-	-
-	2	0	-	-	-	-	-
1	3	1	C	0.035	-	-	-
10	4	2	D	0.35	-	-	-
100	5	3	E orF	3.5	4000	A/B	100
1000	6	4	GorH	35	40000	-	-
10000	7	5	J	350	400000	C	10000
100000	8	6	K	3500	4000000	D	100000
-	-	7	L	-	-	-	-
-	-	-	M	-	-	-	-

　　 潔凈室是指空氣潔凈度達到規定級別要求的可供人類工作的場所 ，其功能是控制微粒的污染 。一般按用途可分為：1.工業潔凈室，以無生命的微粒為控制對象；2.生物潔凈室，主要 控制微生物對工作對象的污染。

　　世界主要國家的潔凈室標準見表1^{［6，7］}。美國是世界上最早頒布潔凈室標準的國家，各國的潔凈室標準都是在美國標準的基礎上，結合各國的實際情況而制訂的，我國的 標準基本上參照美國聯邦標準和歐共體的標準而制訂的。

　　3　潔凈室質控的檢測方法及討論^［8］

　　3.1　塵埃粒子　由于空氣中存在大量塵埃粒子，而微生物大多依附于這些塵埃粒子隨空氣流動造成污染。制藥工業用多種方法獲得無菌狀態，過濾法以其捕集率高，又經濟而被廣泛使用。其中，特別 應該提到的是采用了HEPA(High Eqqicienoy Particulate Air)過濾器，對0.3μm以上空氣 粒子捕集率高達99.97%以上，除濾過病毒外，空氣中所有微生物顆?？杀粸V除。因此，正常潔凈室是無菌的，但是，由于人、物、環境等污染因素，潔凈室往往受到不同程度 污染。因此，我們多采用激光塵埃粒子計數且進行監控。標準見表2。

表2　國內外有關懸浮粒子的測定標準(塵粒數/m³)

潔凈度 　　級別	中國衛生部 　　GMP		美　國 　　FS-209.		世界衛生組織及 　　歐共體GMP
	≥0.5μm	≥5μm	≥0.5μm	≥5 μm	≥0.5μm	≥5μm
100	≤3500	0	3530	-	3500	-
10000	≤350000	≤2000	353000	2470	350000	2000
100000	≤3500000	≤20000	3530000	24700	3500000	2000

　　3.2　空氣微生物　空氣中活微生物大多依附塵埃粒子而形成生物活性粒子。應用細菌采樣器抽取一定量的空氣使其滯留在培養基上，經過培養計數菌落數。早在現代微生物問世之前，人們就認為某些疾 病是由被稱為“瘴氣”的空氣污染而引起。20世紀30年代，英國研制porton液體采樣器，美國研制了AGI液體采樣器。1941年，Bourdion使用裂縫式采樣器，成為空氣微生物采樣測定 的開端。1956年，報道了第一個篩孔撞擊式采樣器，1958年A.A.Andersn對其加以改進并定型生產，稱為安德森(Anderson)空氣微生物采樣器。它由頂罩、6節篩板、3個彈簧及抽氣 孔和動力裝置構成。目前，這種采樣器已發展到8級，并有許多改進型。由于它采集粒譜廣、效率高、生物失活率低等原因而廣泛使用至今?？諝馕⑸锊蓸悠饕话惴譃槠叽箢悾阂后w 式、固體式、沉降式、離心式、光散射式和大容量式。本文將對離心式空氣微生物采樣器(R CS)作詳細討論?？諝馕⑸餃y試標準見表3。